Викладач Стоянова Л.П. Предмет Мікробіологія Група 2 – А л/с Дата Згідно розкладу 23.10.2020 Тема Практика Тема: Антибіотики. Визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків Тема: Антибіотики. Визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків. Актуальність: Антибіотики (від грец. Anti – проти, bios – життя) – це речовини біологічного походження, а також їх похідні синтетичні і напівсинтетичні аналоги, які вибірково пригнічують життєдіяльність мікроорганізмів. Пріоритет у відкритті антибіотиків належать англ. мікробіологу А.Флемінгу. у 1929 р. Вперше виділили пеніцилін З.В.Єрмольєва і Т.І.Балезіна у 1942 р. Кожного року виявляють близько 20 нових антибіотиків і зараз їх кількість перевищує 6 000. Використання антибіотиків захистило життя мільйонів людей. Завдяки їм знизилась кількість післяопераційних ускладнень, захворюваність і смертність від інфекції, підвищилась ефективність лікування інфекційних хвороб, збільшився середній вік людини. Разом з тим антибіотикотерапія і антибітикопрофілактика може призвести до негативних наслідків: алергійних станів, дисбактеріозу, токсичної дії, тератогенної, пригнічення імунітету. У клінічній практиці використовують 2-3% антибіотиків, отриманих із природних джерел. Це пояснюється тим, що деякі з них виявляються надто токсичними для макроорганізма або малоефективними. Для удосконалення лікувальної дії природних антибіотиків отримують напівсинтетичні і синтетичні їх аналоги. Особливо великих успіхів досягнуто в отриманні напівсинтетичних пеніцилінів і цефалоспоринів, які належать до найбільш важливих антибіотиків. Успіхи антибіотико терапії залежать від чутливості збудника до препарату: способу введення, форми патологічного процесу, фази хвороби, стану захисних механізмів організму. Антибіотики, які є найбільш ефективними при певному виді інфекції, до яких чутлива більшість штамів даного збудника, називають препаратами першого вибору (першого ряду). Препарати другого ряду (альтернативні) призначають, коли препарати першої групи неефективні. Антибіотики резерву призначають, коли першого і другого ряду виявились неефективними. Навчальні цілі: ознайомитись з механізмом дії антибіотиків на мікробну клітку, вплив антибіотиків на мінливість на мікроорганізмів, розуміти механізм стійкості мікроорганізмів до антибіотиків. Знати: побічну дію антибіотиків та методи її подолання, принципи антибіотико терапії. Вміти: визначати чутливість мікроорганізмів до антибіотиків диско-дифузійним методом, оцінювати результати антибіотикограми. Виховні цілі: не застосовувати антибіотики без необхідності, дотримуватися інструкції щодо застосування, не застосовувати без перевірки на чутливість до них, щоб попередити негативні наслідки антибіотикотерапії. Обладнання: антибіотики, бактеріофаги, чашка Петрі з МПА, паперові диски, просякнуті різними антибіотиками, пінцет, чиста культура staphilococcus aureus, спиртівка, пастерівська піпетка. Міжпредметні зв’язки: біологія, хімія, анатомія, фізіологія, латинська мова, генетика, фармакологія, догляд за хворими. Контроль вихідного рівня знань Питання для контролю початкового рівня 1. Що таке антибіотики? Що таке бактеріоцини? 2. Які існують джерела добування антибіотиків? 3. Як позначають біологічну активність антибіотиків? 4. На які групи поділяють антибіотики за спектром, спрямованіс¬тю дії, ефектом дії на мікроорганізми, за хімічним складом? 5. Які групи антибіотиків найчастіше вживають з лікувальною і профілактичною метою? 6. Який механізм дії антибіотиків на мікроорганізми? 7. Чому антибіотики називають етіотропними препаратами? 8. Які антибіотики належать до препаратів першого вибору, альтернативних, резерву? 9. Що таке препарати пролонгованої дії? 10. Які основні принципи раціональної антибіотикотерапії? 11. Яку побічну дію можуть спричинити антибіотики? 12. Які існують види резистентності мікроорганізмів до антибіо¬тиків? 13. Які існують механізми формування резистентності у мікро¬організмів? 14. Які причини сприяють селекції резистентних штамів мікро¬організмів? 15. Які заходи слід проводити для подолання резистентності мі¬кроорганізмів? 16. Що таке антибіотикограма? Де її застосовують? 17. Яким вимогам мають відповідати хіміотерапевтичні препа¬рати? 18. Що таке терапевтичний індекс? Яким він має бути? 19. Які основні групи хіміотерапевтичних препаратів викорис¬товують у медичній практиці? Тести 1. Антибіотики відкрив: а) 1.1. Мечников; б) А. Флемінг; в) З.В. Єрмольєва; г) X. Флорі. 2. Білки бактеріального походження, що пригнічують ріст гене¬тично близьких видів бактерій, — це: а) антибіотики; б) бактеріофаги; в) бактеріоцини; г) фітонциди. 3. Вибіркова дія антибіотика на збудник називається: а) бактерицидною; б) бактеріостатичною; в) етіотропною; г) пролонгованою. 4. Найменше ускладнень у макроорганізмі спричинюють антибіо¬тики: а) першого ряду; б) альтернативні; в) резерву. 5. Негативна дія антибіотика на плід проявляється: а) тератогенністю; б) пригніченням імунітету; в) дисбактеріозом. 6. До появи штамів мікробів, резистентних до лікарських препара¬тів, призводить: а) використання одних і тих самих препаратів протягом трива¬лого часу; б) лікування людей і тварин однаковими препаратами; в) недотримання правил використання препарату; г) всі відповіді правильні. 7. Антибіотики, що спричинюють багато ускладнень під час ліку¬вання: а) антибіотики першого вибору; б) антибіотики другого ряду; в) антибіотики резерву. 8. Доза препарату, що пригнічує мікроорганізми: а) бактерицидна; б) бактеріостатична. Препарати пролонгованої дії — це: а) препарати, що мають широкий спектр дії; б) препарати, що діють найбільш ефективно; в) препарати, що швидко виводяться з організму; г) препарати, що затримуються в організмі протягом тривалого часу. 10. Для попередження появи резистентних штамів мікробів: а) використовують комбінацію лікарських препаратів з різним механізмом дії; б) забороняють до використання препарати, до яких є багато ре¬зистентних штамів; в) забороняють до використання у ветеринарії препарати, яки¬ми лікують людей; г) всі відповіді правильні. Практична навичка. Визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків диско-дифузійним методом. Інструкція визначення чутливості мікроорганізмів до антибіотиків Диско-дифузійний метод є найпростішим якісним методом і широко використовується для епідеміологічного контролю резистентності. Чутливість мікроорганізмів до антибіотиків потрібно визначати тільки у чистій культурі. Для виготовлення інокулюму 5-10 однорідних колоній суспензують у 2 мл рідкого середовища або фізіологічного розчину. Бактеріальну суспензію (103 – 105 КУО/мл залежно від виду мікробів) в об’ємі 1 мл рівномірно розподіляють по поверхні середовища при похитуванні чашки, надлишок рідини видаляють піпеткою. Чашки підсушують при кімнатній температурі протягом 20-30 хв., а потім на поверхню засіяного газону на однаковій віддалі кладуть диски з антибіотиками. Результати враховують через 24 та 48 год. після інкубування при оптимальній температурі, вимірюючи діаметри зон затримки росту. Оцінку результатів проводять за спеціальними таблицями, які містять граничні значення діаметрів зон затримки росту для резистентних, помірно резистентних та чутливих штампів, а також значення мінімальної пригнічуючої (інгібуючої) концентраціях (МПК, МІК) антибіотиків для стійких і чутливих штампів. Одержані значення діаметрів зон затримки росту порівнюють з контрольними значеннями таблиць і відносять досліджуванні штампи до однієї з трьох категорій чутливості: чутливі, помірно резистентні, резистентні. 1. Оцінювання результатів антибіотикограми: чутливі, помірнорезистентні, резистентні. 2. Висновки: для лікування використовують той антибіотик, за наявності якого культура не росте – відсутня зона затримки росту. Антибіотикограму використовують для призначення лікування, контролю за ефективністю та визначення прогнозу. 3. Контроль кінцевого рівня. Вирішування ситуаційних задач. Заключний етап, контроль рівня професійних вмінь Ситуаційні задачі 1. У хворого відсутні дані про наявність алергії щодо лікарських препаратів, але часто проявляються різні алергійні та інфекційноалергійні хвороби. Чи можна цьому хворому без застереження вво¬дити терапевтичну дозу антибіотика? 2. Dosis toleranta препарату становить 1,0 г, dosis curativa — 0,25 г. Розрахуйте показник терапевтичного індексу. Чи можна цей препарат використовувати для лікування хворих? 3. Після припинення лікування хворого препаратом пеніцилінового ряду через деякий час стався рецидив хвороби. Що могло бути причиною рецидиву? Література Основна Люта В.А., Кононов О.В. Мікробіологія: підручник. – К.: Медицина, 2008. – 99-112 с. Люта В.А., Кононов О.В. Практикум з мікробіології. – К.: Медицина, 2008. Ситник І.О., Климко С.І., Творко М.С. Мікробіологія, вірусологія, імунологія: підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 1998. Додаткова Воробьев А.А. и др. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология. – М.: Медицинское информационное агенство, 2008. Воробьев А.А., Быкова А.С. Атлас по медицинской микробиологии, вирусологии и иммунологии. – М.: Медицинское информационное агенство, 2003. Пяткін К.Д., Кривошеїн Ю.С. Мікробіологія з вірусологією та імунологією. – К.: Вища школа, 1992. Федорович У.М. Спеціальна мікробіологія. – ч. 1. – Л.: Євро світ, 1998. Федорович У.М. Спеціальна мікробіологія. – ч. 2. – Л.: Ахілл, 2001 Федорович У.М. Спеціальна мікробіологія, ч. 3. – Л.: Сплайн, 2008.